Аллергочип ALEX²

Тест «Alex» (Allergy Explorer) представляет собой передовой диагностический инструмент, относящийся к новому поколению тестов для выявления аллергической сенсибилизации. Разработанный австрийской компанией Macro-Array Diagnostics (MADx) с применением нанотехнологий, этот тест позволяет одновременно анализировать реакцию на большое количество аллергенов. Использование нанотехнологий является ключевым фактором, обеспечивающим высокую плотность размещения аллергенных компонентов (экстрактов и отдельных молекул) на одном чипе, что обуславливает его мультиплексность и комплексность. Появление теста «Alex» стало ответом на растущую потребность в более точной и детализированной диагностике аллергических состояний, особенно в случаях полисенсибилизации, когда традиционные методы могут быть менее информативны или требовать проведения множества отдельных анализов.
Полное наименование теста – Allergy Explorer, часто используются сокращения Алекс, ALEX, ALEX² или ALEX2, где ALEX² обозначает второе, усовершенствованное поколение теста. Разработчиком является австрийская компания Macro-Array Diagnostics (MADx).

Принцип действия теста

Тест «Alex» – это количественный (для специфических иммуноглобулинов E, sIgE) и полуколичественный (для общего IgE, tIgE) иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA), проводимый in vitro. В основе лежит мультиплексная технология (аллергочип, microarray), где нанотехнологии применяются для нанесения широкого спектра аллергенов (как экстрактов, так и молекулярных компонентов), связанных с наночастицами, на твердую фазу чипа. При анализе специфические IgE из сыворотки или плазмы крови пациента связываются с соответствующими аллергенами на чипе. Затем добавляется меченое ферментом анти-IgE антитело, которое образует комплекс. После инкубации и промывки вносится субстрат; фермент катализирует его превращение в окрашенный нерастворимый осадок (преципитат). Количество этого преципитата, пропорциональное концентрации sIgE в образце, измеряется фотометрически.
Важнейшей особенностью теста является интегрированное блокирование перекрестно-реактивных углеводных детерминант (CCD) с помощью специального CCD-ингибитора. CCD – это углеводные структуры, присутствующие во многих растительных и некоторых животных аллергенах, к которым могут вырабатываться IgE-антитела. Такие анти-CCD IgE способны давать ложноположительные результаты на многие аллергены, даже при отсутствии клинически значимой аллергии на их белковые компоненты. Ингибитор в тесте ALEX блокирует связывание этих анти-CCD IgE, что позволяет отличать истинную сенсибилизацию к белковым компонентам от перекрестной реактивности, обусловленной CCD, и тем самым значительно повышает специфичность и точность диагностики. Одновременное определение общего IgE (tIgE) и профиля специфических IgE (sIgE) в одном анализе предоставляет врачу более полную картину аллергического статуса пациента. Хотя повышенный уровень общего IgE не всегда однозначно указывает на аллергию, его оценка в контексте данных по специфическим IgE помогает в дифференциальной диагностике.

Назначение анализа «Alex»

Типы выявляемых аллергенов

Тест Алекс 2 позволяет выявлять специфические IgE к более чем 295-300 аллергенам. Панель включает как экстракты аллергенов (около 117-120), так и отдельные молекулярные компоненты аллергенов (около 178-183). Охватываются основные группы аллергенов: пыльца (трав, деревьев, сорных трав), клещи (домашней пыли, амбарные), эпидермис и шерсть животных, яды насекомых, плесневые и дрожжевые грибы, широкий спектр пищевых продуктов (орехи, молоко, яйца, мясо, рыба, морепродукты, злаки, бобовые, фрукты, овощи, специи), а также латекс. Панель включает более 60 уникальных молекулярных компонентов, не представленных в других системах.

Роль в диагностике аллергических заболеваний

Тест «Alex» предназначен для диагностики IgE-опосредованных аллергических заболеваний (I тип гиперчувствительности). Он помогает выявить причинно-значимые аллергены при различных клинических проявлениях: респираторной аллергии (ринит, бронхиальная астма), кожных симптомах (атопический дерматит, крапивница), пищевой аллергии и риске анафилаксии. Тест позволяет составить «аллергопаспорт» пациента, отражающий полную картину его сенсибилизации, что особенно ценно при полисенсибилизации (чувствительности к множеству аллергенов).
Ключевое значение имеет возможность одновременного определения чувствительности к экстрактам и молекулярным компонентам. Экстракты указывают на сенсибилизацию к источнику аллергена в целом, тогда как молекулярные компоненты позволяют детализировать профиль: выявить маркеры риска тяжелых системных реакций (например, сенсибилизация к запасным белкам орехов Ara h 1, 2, 3, 6 или персика Pru p 3) и отличить истинную (первичную) аллергию от перекрестной реактивности (например, при сенсибилизации к PR-10 белкам, таким как Bet v 1 пыльцы березы и его гомологам в яблоках или моркови, или к профилинам). Эта детализация напрямую влияет на клинические рекомендации, включая оценку риска тяжелых реакций, разработку диетических ограничений и выбор компонентов для аллерген-специфической иммунотерапии (АСИТ). Создание «аллергопаспорта» на основе ALEX-теста имеет долгосрочную ценность, помогая пациенту и врачам принимать обоснованные решения относительно образа жизни и лечения на протяжении длительного времени.

Показания к назначению анализа Алекс

Анализ Алекс рекомендуется при наличии симптомов, подозрительных на аллергию, особенно если их причина неясна или предполагается множественная сенсибилизация. Показания включают:

• Поливалентную сенсибилизацию (аллергия на несколько различных аллергенов).
• Разнообразные аллергические симптомы: зуд глаз, носа, кожи; хронический насморк, чихание; кашель, одышка; кожные высыпания (экзема, крапивница); ангионевротический отек; желудочно-кишечные расстройства (рвота, диарея) после употребления определенных продуктов.
• Диагностированные аллергические заболевания: бронхиальная астма, аллергический ринит/конъюнктивит, атопический дерматит, пищевая аллергия.
• Планирование и подбор компонентов для АСИТ.
• Оценка риска развития тяжелых аллергических реакций.
• Выявление перекрестной реактивности между различными аллергенами и разработка индивидуальных диетических рекомендаций.
• Наличие аллергических заболеваний у родственников (семейный анамнез).
• Неэффективность проводимого лечения аллергии. Тест не имеет абсолютных противопоказаний, может проводиться в любом возрасте (хотя у детей младше 6 месяцев его информативность может быть снижена) и при любом состоянии здоровья, включая периоды обострения аллергического заболевания. Широкий спектр показаний отражает универсальность теста как для первичной комплексной диагностики, так и для углубленного анализа в сложных случаях. Важно, что отрицательный результат теста ALEX при наличии аллергоподобных симптомов может указывать на другие механизмы их развития (не IgE-опосредованные реакции, пищевую непереносимость и др.), что помогает в дифференциальной диагностике.

Процедура проведения анализа «Alex»

Забор биоматериала

Для анализа используется венозная кровь. В некоторых случаях возможно использование капиллярной крови или плазмы (гепаринизированной или цитратной, но не ЭДТА-плазмы). Требуется небольшой объем биоматериала: обычно 100-400 мкл сыворотки/плазмы, что соответствует примерно 1 мл цельной крови. Малый объем забираемой крови делает тест особенно удобным для детей и пожилых пациентов.

Основные этапы лабораторного исследования

После получения образца крови из нее выделяют сыворотку или плазму. Исследование проводится методом мультиплексного ИФА на аллергочипе ALEX. Основные этапы включают:

• Инкубацию образца с чипом: сыворотка/плазма пациента наносится на чип, где иммобилизованные аллергены (экстракты и молекулы) связываются со специфическими IgE. Одновременно происходит ингибирование CCD.
• Промывку для удаления несвязавшихся компонентов.
• Добавление детекционного антитела (анти-IgE антитело, меченное ферментом), которое связывается с образовавшимися комплексами «аллерген-sIgE».
• Повторную промывку для удаления избытка детекционного антитела.
• Добавление субстрата, который под действием фермента образует окрашенный продукт.
• Остановку реакции и количественное определение интенсивности окраски для каждого аллергена с помощью специализированного сканера (например, ImageXplorer или автоматизированные системы MAX) и программного обеспечения (например, RAPTOR SERVER Analysis Software). Результаты выражаются в количественных единицах (обычно kUA/L). Автоматизация и стандартизация процесса способствуют высокой воспроизводимости и надежности результатов.

Подготовка пациента к анализу «Alex»

Специальные требования к подготовке могут незначительно отличаться в зависимости от лаборатории, однако общие рекомендации следующие:

• Диета и голодание: Рекомендуется сдавать кровь натощак (через 8-12 часов после последнего приема пищи) или как минимум через 2-4 часа после еды. Избегать жирной пищи накануне. Употребление чистой негазированной воды обычно разрешено.
• Отмена лекарств: Прием антигистаминных препаратов, как правило, не влияет на результаты теста, и их отмена не требуется. Это является существенным преимуществом по сравнению с кожными пробами, перед которыми антигистаминные необходимо отменять. Прием системных кортикостероидов может исказить результаты, поэтому их прием или отмену следует согласовать с лечащим врачом.
• Прочие рекомендации: За день до исследования рекомендуется исключить алкоголь, интенсивные физические нагрузки и сильное эмоциональное перенапряжение. Не курить за 1 час до сдачи крови. Вариативность в рекомендациях подчеркивает важность уточнения правил подготовки непосредственно в той лаборатории, где будет проводиться анализ.

Заключение

Тест «Alex» (Allergy Explorer) является высокоинформативным и комплексным методом современной аллергодиагностики, позволяющим получить детальное представление о профиле сенсибилизации пациента к широкому спектру аллергенов, включая их молекулярные компоненты. Его применение способствует выявлению истинных причин аллергии, оценке риска тяжелых реакций, пониманию перекрестной реактивности и выбору оптимальной тактики лечения, включая АСИТ. Несмотря на высокую технологичность и информативность, результаты теста «Alex» не являются диагнозом сами по себе. Они должны интерпретироваться квалифицированным врачом-аллергологом в совокупности с анамнезом, клинической картиной заболевания и данными других обследований для постановки точного диагноза и назначения адекватной терапии. Тест является ценным инструментом, но не заменяет клинического мышления специалиста.

Получить индивидуальную консультацию или записи на прием к аллергологу в Новосибирске можно по тел: +7 (383) 388 82 78, пр-кт. Дзержинского, д. 1/1А.